实时定量荧光PCR

       实时定量荧光PCR（Real-time PCR）方法是检测细胞、组织或微生物中基因表达变化，如不同药物浓度处理后相关基因表达水平高低的常用手段之一，与常规PCR（RT-PCR）相比，实时荧光定量PCR具有极高的灵敏度、高度的重复性和极佳的特异性，且后续处理无EB等有害物质的污染，已成为现阶段国际公认的核酸分子定量检测的金标准，在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用。

服务需知：

1、为保证实验的精确性，请客户在取样前与我们取得联系，我公司会派专人去协助取样；客户也可直接提供纯化好的总RNA/DNA（≥ 3 ug/ 样本）。

2、请通过 E-mail 提供已知的全长基因序列或GeneBank号。

3、希望提供详细的背景资料：生物物种信息（Human、Mouse、Rat等），DNA/ RNA来源、基因丰度等。

荧光定量PCR操作流程(以SYBR染料法为例)：

1、根据目的基因序列设计特异性的引物和荧光探针。

2、提取DNA/ RNA，紫外分光光度计检测其完整性和浓度，反转录酶将RNA反转录为cDNA。

3、引物预实验，筛选处特异性最强的引物。

4、荧光定量PCR，采用双标准曲线法，结合内参与目的基因的CT值，进行实验结果分析。

          5、实验完成后，提供完整的实验报告结果（含软件分析结果）及引物等相关实验材料。